DEHP对小鼠精原细胞Bax和Bcl-2表达水平的影响

董瑞娜, 刘殊, 张敏, 戴红, 徐肖倩. DEHP对小鼠精原细胞Bax和Bcl-2表达水平的影响[J]. 生态毒理学报, 2017, 12(5): 270-277. doi: 10.7524/AJE.1673-5897.20170323002
引用本文: 董瑞娜, 刘殊, 张敏, 戴红, 徐肖倩. DEHP对小鼠精原细胞Bax和Bcl-2表达水平的影响[J]. 生态毒理学报, 2017, 12(5): 270-277. doi: 10.7524/AJE.1673-5897.20170323002
Dong Ruina, Liu Shu, Zhang Min, Dai Hong, Xu Xiaoqian. Effect of DEHP on Bax and Bcl-2 Expressions in Mouse Spermatogonial Cells[J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2017, 12(5): 270-277. doi: 10.7524/AJE.1673-5897.20170323002
Citation: Dong Ruina, Liu Shu, Zhang Min, Dai Hong, Xu Xiaoqian. Effect of DEHP on Bax and Bcl-2 Expressions in Mouse Spermatogonial Cells[J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2017, 12(5): 270-277. doi: 10.7524/AJE.1673-5897.20170323002

DEHP对小鼠精原细胞Bax和Bcl-2表达水平的影响

    作者简介: 董瑞娜(1989-),女,硕士生,研究方向为环境毒理学,E-mail:drn0015@126.com
  • 基金项目:

    内蒙古自治区2012年自然科学基金(2012MS1146);2015年内蒙古医科大学青年创新基金(dncx201506)

  • 中图分类号: X171.5

Effect of DEHP on Bax and Bcl-2 Expressions in Mouse Spermatogonial Cells

  • Fund Project:
  • 摘要: 邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(di(2-ethylhexyl)phthalate, DEHP)因在环境中的广泛分布而受到普遍关注。为探究DEHP对雄性生殖细胞的毒作用机制,将小鼠精原细胞(GC-1spd)分别暴露于终浓度为0(对照)、10、100、1 000 mg·L-1DEHP的培养基中培养24 h,采用噻唑兰(MTT)法检测细胞相对活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR法检测Bax和Bcl-2 mRNA的表达情况及Western blot技术检测Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果显示:在检测细胞相对活力时,1 000 mg·L-1剂量组明显低于其他各剂量组,100 mg·L-1剂量组低于对照组和10 mg·L-1剂量组(P<0.05);在检测细胞凋亡时, 1 000 mg·L-1剂量组早期凋亡率高于对照组(P<0.05);晚期凋亡率1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组均明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05);总凋亡率呈现明显上升趋势,其中1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组还明显高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示:Bax mRNA表达水平1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组与10 mg·L-1剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05);Bcl-2 mRNA表达水平1 000 mg·L-1剂量组低于10 mg·L-1剂量组和对照组(P<0.05)。此外,Bax和Bcl-2 mRNA比值1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组均明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05)。Western blot结果显示,Bax蛋白表达水平1 000 mg·L-1剂量组高于对照组(P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平各剂量组与对照组相比差异均具有统计学意义,且1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显低于10 mg·L-1剂量组和对照组(P<0.05);此外,Bax/Bcl-2两蛋白比值1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显高于对照组,而1 000 mg·L-1剂量组高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05)。结果表明:DEHP可诱导小鼠精原细胞相对活力下降,通过抑制Bcl-2 mRNA和Bcl-2蛋白表达及促进Bax mRNA和Bax蛋白表达实现诱导精原细胞凋亡。
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出版历程
  • 收稿日期:  2017-03-23

DEHP对小鼠精原细胞Bax和Bcl-2表达水平的影响

    作者简介: 董瑞娜(1989-),女,硕士生,研究方向为环境毒理学,E-mail:drn0015@126.com
  • 1. 内蒙古医科大学, 呼和浩特 010110;
  • 2. 同煤集团职业病防治院, 大同 037003;
  • 3. 包头医学院, 包头 014040
基金项目:

内蒙古自治区2012年自然科学基金(2012MS1146);2015年内蒙古医科大学青年创新基金(dncx201506)

摘要: 邻苯二甲酸(2-乙基己基)酯(di(2-ethylhexyl)phthalate, DEHP)因在环境中的广泛分布而受到普遍关注。为探究DEHP对雄性生殖细胞的毒作用机制,将小鼠精原细胞(GC-1spd)分别暴露于终浓度为0(对照)、10、100、1 000 mg·L-1DEHP的培养基中培养24 h,采用噻唑兰(MTT)法检测细胞相对活力,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,实时荧光定量PCR法检测Bax和Bcl-2 mRNA的表达情况及Western blot技术检测Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果显示:在检测细胞相对活力时,1 000 mg·L-1剂量组明显低于其他各剂量组,100 mg·L-1剂量组低于对照组和10 mg·L-1剂量组(P<0.05);在检测细胞凋亡时, 1 000 mg·L-1剂量组早期凋亡率高于对照组(P<0.05);晚期凋亡率1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组均明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05);总凋亡率呈现明显上升趋势,其中1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组还明显高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05)。实时荧光定量PCR检测结果显示:Bax mRNA表达水平1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组与10 mg·L-1剂量组比较差异具有统计学意义(P<0.05);Bcl-2 mRNA表达水平1 000 mg·L-1剂量组低于10 mg·L-1剂量组和对照组(P<0.05)。此外,Bax和Bcl-2 mRNA比值1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组均明显高于对照组,1 000 mg·L-1剂量组高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05)。Western blot结果显示,Bax蛋白表达水平1 000 mg·L-1剂量组高于对照组(P<0.05);Bcl-2蛋白表达水平各剂量组与对照组相比差异均具有统计学意义,且1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显低于10 mg·L-1剂量组和对照组(P<0.05);此外,Bax/Bcl-2两蛋白比值1 000 mg·L-1和100 mg·L-1剂量组明显高于对照组,而1 000 mg·L-1剂量组高于10 mg·L-1剂量组(P<0.05)。结果表明:DEHP可诱导小鼠精原细胞相对活力下降,通过抑制Bcl-2 mRNA和Bcl-2蛋白表达及促进Bax mRNA和Bax蛋白表达实现诱导精原细胞凋亡。

English Abstract

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